腦利鈉肽（BNP）
抗體參數(shù)
| 名稱 | 腦利鈉肽抗體（BNP antibody） | |
| 貨號 | K136m1 | R195e5 |
| 類型 | 單克隆抗體 | |
| 反應(yīng)物種 | 人 | |
| 應(yīng)用平臺 推薦配對 |
化學發(fā)光、免疫層析 | |
| R195e5（捕獲）-K136m1（檢測） | ||
| 純度 | Protein A/G純化，純度>95% | |
| 緩沖液 | 1xPBS，pH 7.4 | |
| 儲存 | -20℃或更低溫度，分裝保存，避免反復凍融 | |
產(chǎn)品數(shù)據(jù)
1.雅培樣本符合率
用BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學發(fā)光試劑，檢測55例雅培賦值樣本，樣本符合率（R2）為0.9988。
| 編號 | 樣本濃度 （pg/mL） |
RLU |
| 1 | ＜10 | 8355 |
| 2 | ＜10 | 9563 |
| 3 | 15.3 | 21366 |
| ? | ? | ? |
| 54 | 3750 | 5689869 |
| 55 | ＞4000 | 6971339 |
表1. BNP臨床對比分析數(shù)據(jù)（雅培賦值）
圖1. BNP臨床對比分析（雅培賦值）
2.最低檢測限
用BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學發(fā)光試劑，對零濃度稀釋液重復測定20次，計算最低檢測限。
| 名稱 | 濃度（pg/mL） | RLU平均值 | 線性方程 |
| 校準品S1 | 0 | 4833 | y=274x+4833 |
| 校準品S2 | 5 | 6203 | |
| 20次重復測定零濃度稀釋液RLU值 | |||
| 4766 | 4836 | 5122 | 4879 |
| 4933 | 4988 | 4820 | 4566 |
| 4803 | 5103 | 4766 | 4968 |
| 5108 | 5269 | 4822 | 4875 |
| 4998 | 5169 | 4923 | 4888 |
| RLU均值 | 4930 | ||
| SD | 165.8 | ||
| 平均值+2SD | 5262 | ||
| 最低檢測限（pg/mL） | 1.565 | ||
表2. BNP化學發(fā)光試劑最低檢測限
3.線性
將濃度為5010pg/mL的雅培賦值高濃度樣本，用樣本稀釋液稀釋為40%、20%、10%、2%、0.2%和0.1%六個濃度。用BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學發(fā)光試劑對高濃度樣本及六個稀釋樣本進行檢測，計算相關(guān)性。
| 百分比 | 濃度（pg/mL） | RLU | 絕對偏差 | 相對偏差 |
| 100% | 5010 | 7616661 | / | -0.10% |
| 40% | 2021 | 3045882 | / | 0.70% |
| 20% | 1002 | 1487627 | / | -0.10% |
| 10% | 492.5 | 708500 | / | -1.80% |
| 2% | 101.3 | 110277 | / | 0.80% |
| 0.2% | 10.18 | 12850 | -0.06 | / |
| 0.1% | 4.93 | 6114 | -0.07 | / |
| 相關(guān)性：0.99999 | ||||
表3. BNP化學發(fā)光試劑線性
4.重復性
利用同一批BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學發(fā)光試劑對濃度為50.28pg/mL和1019pg/mL的雅培賦值樣本各重復檢測10次，其測量濃度變異系數(shù)（CV）均小于2.5%。
| 低值樣本 | ||
| 編號 | RLU | 濃度（pg/mL） |
| 1 | 65235 | 51.01 |
| 2 | 63682 | 49.80 |
| 3 | 65222 | 51.00 |
| 4 | 64580 | 50.50 |
| 5 | 65607 | 51.30 |
| 6 | 66890 | 52.30 |
| 7 | 66338 | 51.87 |
| 8 | 62438 | 48.83 |
| 9 | 63502 | 49.66 |
| 10 | 67082 | 52.45 |
| 平均值 | / | 50.87 |
| 標準差 | / | 1.187 |
| CV | 2.3% | |
表4. BNP化學發(fā)光試劑重復性（低值）
| 高值樣本 | ||
| 編號 | RLU | 濃度（pg/mL） |
| 1 | 1492215 | 1003 |
| 2 | 1462854 | 985.8 |
| 3 | 1507507 | 1015 |
| 4 | 1483346 | 999.2 |
| 5 | 1571733 | 1048 |
| 6 | 1572866 | 1048 |
| 7 | 1565617 | 1053 |
| 8 | 1516682 | 1021 |
| 9 | 1505978 | 1014 |
| 10 | 1482275 | 998.5 |
| 平均值 | / | 1018.55 |
| 標準差 | / | 23.691 |
| CV | 2.33% | |
表5. BNP化學發(fā)光試劑重復性（高值）
5.準確度
將濃度為1001pg/mL的雅培賦值高濃度樣本，按照1：9的體積比加入到濃度為49.23pg/mL的低濃度血清中，配制成濃度為144.41pg/mL的回收樣品，用BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學發(fā)光試劑進行檢測，計算回收率。
| 待測物 | 測定濃度（pg/mL） | RLU | 濃度平均值（pg/mL） |
| 高濃度樣本 | 1002 | 1487627 | 1004.50 |
| 999.5 | 1483804 | ||
| 1012 | 1502919 | ||
| 低濃度血清 | 50.16 | 64144 | 49.57 |
| 49.88 | 63785 | ||
| 48.68 | 62245 | ||
| 回收樣品 | 144.2 | 184797 | 140.77 |
| 137.8 | 176586 | ||
| 140.3 | 179794 | ||
| 回收率 | 95.72% | ||
表6. BNP化學發(fā)光試劑回收率
6.熱穩(wěn)定性
將BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學發(fā)光試劑組份分別放置于37℃培養(yǎng)箱和4℃冰箱中加速7天，分別測試高、低值質(zhì)控品，比較其偏差。
| 低值質(zhì)控品 | ||||
| 編號 | RLU | 濃度（pg/mL） | ||
| 4℃7天 | 37℃7天 | 4℃7天 | 37℃7天 | |
| 1 | 62501 | 60962 | 48.88 | 47.68 |
| 2 | 65516 | 62219 | 51.23 | 48.66 |
| 3 | 63798 | 60936 | 49.89 | 47.66 |
| 偏差 | 4.2% | |||
表7. BNP化學發(fā)光試劑熱穩(wěn)定性（低值）
| 高值質(zhì)控品 | ||||
| 編號 | RLU | 濃度（pg/mL） | ||
| 4℃7天 | 37℃7天 | 4℃7天 | 37℃7天 | |
| 1 | 1492215 | 1451232 | 1005 | 978.2 |
| 2 | 1502919 | 1436552 | 1012 | 968.6 |
| 3 | 1487627 | 1439458 | 1002 | 970.5 |
| 偏差 | 3.6% | |||
表8. BNP化學發(fā)光試劑熱穩(wěn)定性（高值）
試用申請
BNP臨床診斷意義
腦鈉肽（BNP）又稱B型利鈉肽，由32個氨基酸組成，是哺乳動物心肌細胞的主要利鈉肽之一。BNP的最初翻譯產(chǎn)物為前BNP原（preproBNP），含134個氨基酸；切除信號肽后形成含108個氨基酸的BNP前體（proBNP），并儲存于心肌分泌顆粒中。當心肌細胞在跨壁應(yīng)激增加時，proBNP釋放并裂解成有活性的BNP和無活性的N端腦鈉肽前體（NT-proBNP）。BNP最終與鈉肽C受體（NPR-C）結(jié)合，繼而被胞吞和溶酶體降解。
腦鈉肽（BNP）與心功能不全、心肌缺血
BNP濃度在心功能紊亂時，隨著心室壓力的增大而顯著升高；心衰患者接受治療12小時之后，BNP濃度顯著下降。 因此BNP可作為心力衰竭和心肌梗死預后的一個獨立預測因子，動態(tài)監(jiān)測心衰患者的治療效果，是急診室心衰診斷的“金標準”。
BNP參考值（依據(jù)2008ESC心衰指南）：
| BNP< 100pg/ml | 基本排除心衰，其陰性預測準確性高達97.7% |
| 100pg/ml< BNP< 400pg/ml | 不確診 |
| BNP >400pg/ml | 心衰可能 |
腦鈉肽（BNP）與急性缺血損傷
心肌缺血可觸發(fā)許多內(nèi)源性細胞保護因子如BNP的釋放。在急性心肌梗死的大鼠心臟模型中，外源性給予BNP，可以以濃度依賴性的方式限制梗死面積，這是一種獨立于肽的內(nèi)分泌的細胞保護作用。BNP的這種急性保護作用機制似乎與第二信使三磷酸鳥苷轉(zhuǎn)化為環(huán)磷酸鳥苷（cGMP）的增加有關(guān)，并涉及線粒體ATP敏感性鉀（KATP）通道的開放。許多內(nèi)源性保護介質(zhì)被認為是作用于G蛋白偶聯(lián)受體，通過線粒體KATP通道開放產(chǎn)生抗缺血作用的。在一些心臟疾病狀態(tài)下， G蛋白偶聯(lián)受體反應(yīng)可能下調(diào)；此時BNP采用了新的分子信號途徑，BNP/NPR-A誘導cGMP升高并激活cGMP依賴性蛋白激酶-I（cGK-I），通過cGMP/cGK-I途徑開放KATP通道。因此BNP/NPR-A信號通路可以作為一種非常有效的儲備救助途徑，保護和挽救組織。
腦鈉肽（BNP）與心肌梗死后重塑
心肌梗死后心肌BNP表達的持續(xù)升高，影響組織重塑，這個可能與BNP抑制成纖維細胞活性和心肌細胞肥大作用有關(guān)。研究表明，梗死后BNP和心鈉素（ANP）對心肌成纖維細胞有明顯作用。這兩種肽都抑制體外缺氧時心臟成纖維細胞的膠原合成，并抑制血管緊張素Ⅱ刺激時的成纖維細胞增殖。在bnp基因缺失的小鼠中發(fā)現(xiàn)了多灶性心臟纖維化。NPR-A-/-敲除小鼠也會出現(xiàn)高血壓，并伴有過度表達心肌肥大和纖維化。
綜上所述，腦鈉肽（BNP）是一種多效性肽，其對無癥狀左室功能不全、心力衰竭、急性缺血和心肌梗死等心臟疾病具有重要的臨床診斷和治療意義。
參考文獻
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